Соп маркировка животных

Соп маркировка животных Маркировка

Основная цель этой статьи заключается в оказании помощи ученым в выборе более надежного и подходящего метода маркировки и идентификации лабораторного животного для проведения научно-исследовательской работы. В любом исследовании индивидуальный идентификационный номер животного является строго необходимым для связи этапов выполнения: работа с животными на протяжении всего эксперимента, работа с образцами от животных (органы, биологические жидкости и пр.). Также целью данной статьи было представить обновленную информацию о методах, используемых для маркировки грызунов в различных ситуациях. Процедура маркировки является необходимым условием для проведения исследования на высоком уровне, так же имеет большое значение и степень инвазивности метода. Кроме этого, необходимо провести оценку длительности эксперимента и этической составляющей способа маркировки и выбрать подходящий метод. В статье рассмотрены как традиционные методы, так и новые подходы для маркировки и идентификации животных. В идеале, метод маркировки должен обеспечить уверенную идентификацию животного, быть технически легко выполнимым, не оказывать неблагоприятного воздействия на животных.

Ключевые слова: Благополучие животных, биопсия, идентификация, определение грызунов, носок отсечение.

Здоровье и благополучие животных является основной целью Европейской Ассоциации Науки о лабораторных животных (FELASA). Ассоциацией была создана рабочая группа по вопросу маркировки и идентификации лабораторных животных, целью которой являлась передача опыта о методах маркировки и оценка их влияния на благополучие животных. Новая директива 2010/63 / ЕС не дает представления о методах маркировки животных. Это означает, что выбор метода маркировки зависит от национального законодательства.

Наличие индивидуальной идентификации является необходимым условием для проведения исследований с использованием животных.

Существует широкое разнообразие способов маркировки животных, однако влияние каждого способа маркировки по отношению к животному различно.

В связи с этим не стоит забывать про улучшение и разработку новых методов. Выбор метода маркировки зависит от традиций каждой страны, лаборатории. При проведении опросов в 2007 году на базе институтов были получены данные, что в США, Канаде и Европе в основном используется методика маркировки при помощи выщипов на ушах и использование ушных клипс. Наименее широко используются микротату на ушных раковинах.

Все методы маркировки, как правило, однократные процедуры, что позволяет минимизировать в дальнейшем при использовании животных страдание, дискомфорт, боль.

Процедура маркировки является самой первой процедурой, которой подвергаются животные, например, сразу при отъеме от матери или даже ранее.

Инвазивные методы маркировки требуют более длительного периода восстановления животного перед исследованием. Например, в результате нанесения тату появляется отек и кровоточивость в результате прокола. Использование обезболивания и наркоза сокращает период восстановления после инвазивных и болезненных процедур. В связи с очень маленьких размером тела лабораторных животных тяжело использовать местные анестетики/ анальгетики. Ингаляционная анестезия считается необходимой для облегчения острой боли во время процедуры маркировки. Для устранения послеоперационной боли, ингаляционная анестезия должна сочетаться с обезболиванием.

Необходимо каждый раз совершенствовать методы маркировки с целью облегчения страдания, которому будет подвергнуто животное до и после проведения процедуры маркировки. Кроме того успех любого метода зависит от подготовки лица который будет выполнять процедуру и от качества инструментов с помощью которых будет выполнена процедура. В этом обзоре рассмотрены методы маркировки:

Подкожное введение чернил

Подкожная инъекция чернил отличается от татуировки тем, что чернила вводят под кожу, а не в слои кожи. Все субстанции, введенные подкожно исчезают из подкожного депо.

Чернила также исчезают через некоторое время (от нескольких часов до нескольких дней).

Способ обеспечивает ограниченные возможности нумерации, хотя могут быть использованы различные цвета.

Этот метод может быть использован в животных всех возрастов, в том числе новорожденных. Ограничивает применение метода короткий период сохранения маркировки

Ушные бирки изготавливаются из металла или пластика. Они прикрепляются к уху с помощью специальных щипцов. Метки доступны в различных размерах, которые могут использоваться для различных видов животных, предварительно пронумерованные, что позволяет идентифицировать очень большое количество животных. Специальные щипцы с меткой крепят на видимую поверхность ушной раковины. Метки должны быть прикреплены к основанию ушной раковины (рисунок 1, 2), что позволяет предотвратить сгибание ушной раковины, которое в дальнейшем может вызвать раздражение и страдание у животного. Правильное крепление облегчает считывание метки при маркировке животного. Состояние ушных раковин должно постоянно проверяться персоналом по уходу за животными. При повреждении и развитии воспалительной реакции, метки должны быть немедленно удалены.

Этот метод маркировки является недорогим, легким и быстровыполнимым. Существует некоторый риск, что животное может потерять бирку. При проведении процедуры необходимо учесть, что ушная раковина не полностью развита до двухнедельного возраста и имеет недостаточную поверхность, чтобы вместить бирку. Данный метод маркировки следует проводить не ранее, чем после отъема от матери. Кроме того при проведении опытов с использованием магнитно -резонансной томографии (МРТ), металлические ушные бирки должны быть удалены, поскольку они будут мешать. Способ является болезненным и требует надлежащей фиксации животных и, следовательно, это причинит боль и дискомфорт, но в течении короткого времени.

Рис.1. Правильное положение металлической бирки

Рис.2. Неправильное расположение металлической бирки, высокий риск раздражения, дискомфорта

Инвазивные методы постоянной маркировки, без возможности получения образца ткани для ДНК анализа

Некоторые части тела у грызунов, такие как уши, хвост, подошва и подушечки пальцев могут быть использованы для маркировки при помощи нанесения татуировки.

Процедура включает внутрикожное введение чернил для татуировки с помощью инструмента для татуировки . Чувствительность части тела, где будет нанесена татуировка, изменится. Чернила должны быть введены в дерму, под эпидермис (верхний слой кожи), чтобы создать постоянный резервуар чернил. Кожный барьер при этом нарушается из-за химического влияния соединений содержащихся в чернилах. Это создает два типа рисков: те, которые связаны с токсичностью и те, которые могут повлиять на исследование. Татуировочные иглы всегда должны быть чистыми (асептическими), острыми и регулярно заменяемыми. Пигменты, входящие в состав чернил, как правило, являются минералами, на органической основе. Вещества, которые являются токсичными или которые могут повлиять на результаты исследований не должны использоваться. Татуировка является постоянным методом маркировки, но чернила могут поблекнуть и становятся неразборчивыми со временем. Число возможных комбинаций идентификаций может варьироваться в зависимости от цвета чернил и комбинаций мест введения. В целом, процедура нанесения татуировки требует обучения, прежде чем она может быть выполнена должным образом.

Рис. 3. Оборудование необходимое для проведения татуировки уха

Альтернативой использования машины для татуировки является использование пинцета. Это делается вручную, что ограничивает возможности по количеству нанесенных чисел Недостатками ручного метода с использованием пинцета также является боль, степень которой, зависет от мастерства лица, осуществляющего процедуру.

Татуировка подошвы и подушечек палец

Система микротату также может быть использована, чтобы нанести тату в подушечку палец или подошву стопы путем вставки иглы через кожу конечностей (рисунок 4). Игла не должна быть вставлена через весь палец или конечность. Важным преимуществом этого метода является возможность для идентификации животных всех возрастов, даже тогда, когда пальцы новорожденных еще не разделены. Как альтернативное оборудование может быть использован пинцет, так же как и для татуировки хвоста. Данный метод маркировки считается болезненным, но используемая игла данного метода может быть адаптирована к размеру тела животного.

Рис. 4. Нанесение татуировки на подушечку пальца

Для данного метода используются электронные радиочастотные транспондеры, которые широко известны как микрочипы, и являются высокоэффективным методом идентификации. Микрочип вводиться подкожно животному, дальнейшее считывание производиться при помощи считывателя, который отображает информацию (число) от микрочипа. Микрочип имплантируют в область шеи, через специальный шприц. Система микрочипа является постоянным методом идентификации и позволяет идентифицировать бесконечное число животных. Большинство считывателей может быть подключено к компьютеру, что дает возможность собирать различные данные от определенного животного и передавать их непосредственно к базам данных. Микрочип имеет преимущество перед другими методами в том, что ошибки идентификации исключены. Риск перемещения, исчезновения, поломки относительно мал. Rao, Edmondson в 1990 провели мониторинг 140 имплантированных мышей в течение двух лет, и обнаружили, что 2% мышей потеряли свои чипы, и у 2,8% чипы не передавали данные.

Рис. 5. Виды чипов

Данный вид идентификации является самым дорогим методом (затраты на приобретение считывателя и сами микрочипы). И, наконец, разные типы микрочипов передают данные на разных длинах волн и, следовательно, требуют разных считывателей. Это необходимо предусмотреть перед транспортировкой животных в другие лаборатории.

Инвазивные постоянные методы маркировки, с возможностью забора образца ткани для анализа ДНК

Дистальное удаление фаланги

Для проведения манипуляции необходимо зафиксировать щенка в области шеи, и удерживать ногу, на которой будет произведена резекция фаланги.

Кроме того, необходимо, избегать резких движений, которые могли бы привести к травматизму. Ножницы должны небольшими (например, глазные микрохирургические) быть стерильными и острыми, для минимизации рисков неблагоприятного воздействия на семидневного щенка. Удаленная фаланга может быть использована для проведения анализа ДНК (данного количества ткани достаточно для полимеразноцепной реакции). Самцам и самкам в одном помете может быть использована одинаковая комбинация, так как они могут быть разделены по полу. Это может уменьшить количество фаланг, которые нужно будет удалять. Чтение маркировки (отсутствие ногтя или кончика пальца на лапе) требует, чтобы животное взяли из клетки и поставить лапы на поверхность, так, чтобы была возможность исследовать лапу. Иногда фиксация может быть необходима. Данный метод маркировки является постоянным и при правильном выполнении его можно использовать очень длительное время.

Соп маркировка животных

Рис. 6. Удаление фаланги

Сегодня этот метод постоянной маркировки у щенков мышей является преимуществом, так как одновременно можно произвести отбор проб одновременно ткани для генотипирования. Ранний отбор и генотипирование сокращает затраты на содержание животных. Рабочая группа FELASA рекомендует использовать этот способ только в сочетании с генотипированием и исключительно для молодых щенков мышей.

Первый экономически доступный способ описан в 2010 году — это модификация классической бирки – мини ушные бирки http://www.zonotid.com/. Альтернатива традиционным ушным биркам представляет собой легкую пластиковую бирку (0,07 г), который имеет 2D штрих-код. Его прикрепляют на ушную раковину аналогично традиционным биркам.

Этот тип бирки легче и, следовательно, должен снизить риски инфекций или воспаления в ухе, вызванном раздражением от бирки. Кроме того, пластмассовый материал снижает риск проявления аллергической реакции на бирку. Эти виды бирок для уха становятся доступными на рынке.

Это новый метод с радиочастотной идентификации, с использованием микротранспондерного чипа при помощи имплантации подкожно в ухо или хвост мышей. Основные преимущества использования света активированного микротранспондера в сравнении с другими методами идентификации являются их малый размер, что сводит к минимуму нагрузку на животных при имплантации.

Биометрическая идентификация лабораторных грызунов

Этот новый метод использует шаблон строения кровеносных сосудов уха животного, аналогично отпечаткам пальцев. Данный метод может быть использован после отъема, когда уши будут полностью развиты. Информация заносится и хранится в специальной базе данных.

Люминесцентные микротатуировка (LMT)

С помощью этого метода, очень маленькие люминесцентные пигменты наносятся на кожу животного, например, на основание хвоста или уха, в виде точек. Манипуляция выполняется помощью микро-иглы с закодированным массивом пигментов для одноразового использования. Каждый массив представляет только один код. Игла проникает в кожу животного, и оставляет пигмент в виде кода, , который можно прочитать сканером.

Выбор метода маркировки и идентификации должен основываться на научных данных, а не личных мнений и традиций. Несомненно, необходимы дальнейшие исследования, чтобы тщательно оценить влияние различных методов маркировки и внедрению нового метода должна предшествовать детальная научная оценка.

Все новые методы имеют преимущества с точки зрения благосостояния животного и рекомендуются к применению, хотя их наличие (и применимость) ограничена. На сегодняшний день микрочип единственный доступный метод поддерживающий передачу информации «онлайн» на компьютер.

Важным направлением для дальнейшего исследования является использование обезболивания / анестезии во время и после процедуры маркировки.

Длительная боль может иметь большее неблагоприятное влияние на благосостояние животных, чем любая острая боль, испытываемая во время процедуры маркировки.

Marking and identification of laboratory animals for different researches.

The primary aim of this report is to assist scientists in selecting more reliable/suitable identification (ID) methods for their studies. This is especially true for genetically altered (GA) animals where individual identification is strictly necessary to link samples, research design and genotype. The aim of this Federation of European Laboratory Animal Science Associations working group was to provide an update of the methods used to identify rodents in different situations and to assess their implications for animal welfare. ID procedures are an indispensable prerequisite for conducting good science but the degree of invasiveness differs between the different methods; therefore, one needs to make a good ethical evaluation of the method chosen. Based on the scientific literature the advantages and disadvantages of various methods have been presented comprehensively and this report is intended as a practical guide for researchers. New upcoming methods have been included next to the traditional techniques. Ideally, an ID method should provide reliable identification, be technically easy to apply and not inflict adverse effects on animals while taking into account the type of research. There is no gold standard method because each situation is unique; however, more studies are needed to better evaluate ID systems and the desirable introduction of new and modern approaches will need to be assessed by detailed scientific evaluation.

Keywords: Animal welfare, biopsy, refinement, rodent identification, toe clipping

Идентификация лабораторных животных

Идентификация лабораторных животных строго необходима для полноценных научных экспериментов на различных этапах проведения доклинических исследований на высоком уровне.

Методы идентификации

Для животных разных видов применяют разные метки:

Оборудование для маркировки лабораторных животных

В каталоге компании ООО «Аналитика и приборы» представлен широкий выбор приборов, аксессуаров и приспособлений для распознавания животных, участвующих в научных экспериментах: ушные бирки, маркеры, чипы. Все они отвечают самым строгим международным стандартам GLP и российскому стандарту надлежащей лабораторной практики.

Опытные консультанты, готовые всегда прийти на помощь в выборе, рассказать о технических особенностях и правилах применения того или иного реализуемого нами продукта, конкурентные цены, возможность доставки товара по Санкт-Петербургу, Москве и всей России – все это делает сотрудничество с нами удобным, продуктивным и взаимовыгодным.

Заполните форму обратной связи на сайте или свяжитесь с нами по указанным телефонам, чтобы сделать заказ или получить расширенную консультацию наших специалистов!

Стандартные операционные процедуры

Стандартная операционная процедура (СОП) – это документ, детально описывающий процедуры манипуляций, которые, как правило, подробно не описываются в протоколах конкретных исследований. Написание СОП осуществляется квалифицированными в данной области специалистами. СОП утверждается руководством исследовательской организации и подлежит строгому исполнению, так как формирует правильное и пошаговое представление о процедуре или манипуляции, что уменьшает вероятность допущения ошибок, тем самым, гарантируя высокое качество работы. Все отклонения от СОП документируются как первичные данные, они подписываются руководителем исследования или ответственным исполнителем. Кроме этого рассматривается вопрос о влиянии данного отклонения от СОП на качество получаемых данных.

При написании СОП на первой странице обычно указывается следующая служебная информация.

В качестве приложений к СОП могут выступать различные бланки, которые будут использоваться для регистрации данных, полученных при выполнении процедуры. Бланк должен содержать (в виде колонтитула) следующую информацию: номер приложения, номер СОП, номер версии, дата введения СОП в действие.

СОП подлежит своевременному пересмотру. Очередной пересмотр обычно проводят один раз в 2 года. Если СОП утрачивает актуальность в связи с изменением методики или заменой оборудования, все копии документа изымаются из обращения, и оригинал передается в Архив. Содержание СОП может быть изменено, дополнено или сокращено до наступления периода пересмотра, если это необходимо для работы. В этом случае оформляется поправка к СОП. При пересмотре учитываются все имеющиеся поправки. После пересмотра СОП также утверждается руководством исследовательской организации. Оригиналы устаревших версий СОП сохраняются в Архиве.

Согласно международным принципам надлежащей лабораторной практики (Good Laboratory Practices – GLP), разработанным организацией экономического сотрудничества и развития (Organization for Economic Cooperation and Development – OECD) исследовательская организация должна иметь Программу СОП, отражающую весь спектр проводимых работ. Программа СОП должна включать в себя, но не ограничиваться, описание следующих видов деятельности.

Использование, обслуживание, уход, калибровка.

б) Компьютерные системы.

Валидация, порядок работы и обслуживания, порядок доступа к информации, контроль над внесением изменений, создание резервных копий.

в) Вещества, реактивы и растворы.

Приготовление и маркировка.

б) получение, транспортировка, размещение, характеристика и идентификация тест-систем, уход за ними;

в) подготовка тест-систем, наблюдения и осмотры до, во время и после исследования;

г) обращение с тест-системами, умирающими или умершими во время исследования;

д) сбор, идентификация и порядок работы с образцами, включая некропсию и патоморфологические исследования;

е) размещение тест-систем на исследовательских площадках.

Подписан закон о маркировке животных

Закон, направленный на регулирование процесса маркирования и учета животных в России, подписан президентом и опубликован на официальном портале правовой информации — домашние питомцы в число маркируемых животных не включены.

домашние животные не подлежат обязательной маркировке

Как поясняли ранее авторы документа, принимая во внимание, что положения закона направлены на обеспечение прослеживаемости продукции животноводства в целях реализации принципа осуществления сквозного контроля «от поля до прилавка», первичным звеном которой является учет животных, учету не будут подлежать животные, не относящиеся к сельскохозяйственным животным и принадлежащие гражданам.

Однако служебные животные, принадлежащие федеральным органам исполнительной власти в области обороны, в сфере внутренних дел, в сфере деятельности войск национальной гвардии Российской Федерации, в сфере исполнения наказаний, в сфере государственной охраны и в области обеспечения безопасности, должны быть промаркированы.

Перечень видов животных, подлежащих индивидуальному или групповому маркированию и учету, случаи осуществления индивидуального или группового маркирования и учета животных, а также сроки осуществления учета животных устанавливаются правительством РФ.

Как следует из документа, маркирование представляет собой «нанесение на тело животного, закрепление на теле животного или введение в тело животного визуальных, электронных или смешанных (сочетание визуального и электронного) средств маркирования или в случаях осуществления группового маркирования животных нанесение визуальных средств маркирования на сооружение, предмет, приспособление (садок, террариум, инсектариум и другие) или помещение, в которых содержится группа животных».

Владельцы животных вправе самостоятельно выбрать тип средства маркирования в зависимости от вида животного.

Маркирование животных осуществляется владельцами животных за свой счет самостоятельно или посредством привлечения иных лиц.

Срок вступления закона о маркировке животных

Федеральный закон вступает в силу с 1 сентября 2023 года.

Маркировка сельхозживотных станет обязательной с 1 марта 2024 года, а служебных — с 1 марта 2025 года.

Компания МАСТЕР осуществляет поставку и настройку оборудования для маркировки любых видов предметов.

На наш взгляд логичнее всего на данный момент будет использовать индивидуальное штрихкодирование животных по средствам RFID меток, а групповое штрихкодирование (общего помещения, загона, участка и пр.) по средствам QR кода.

Содержание лабораторных животных в питомниках и ЭБК создает потенциальную возможность взаимного инфицирования человека и животных (антропозоонозы), а также перекрестного инфицирования животных, во избежание чего необходимо строгое соблюдение правил личной гигиены работников.

Сотрудники, работающие с лабораторными животными, должны ежегодно проходить медицинское обследование по правилам, действующим для пищевой промышленности, носители патогенной для животных флоры, включая антропозоонозы, как и больные люди, к работе с животными не допускаются.

Рекомендуется проводить раз в 3 года медицинское обследование персонала, сходное с проводимым при приеме на работу, включающее сдачу образцов сыворотки.

Работа с лабораторными животными требует соблюдения норм биобезопасности, так как существует опасность инфицирования человека болезнетворными бактериями и микроорганизмами. Человек может являться носителем микробов, способных передаваться животным.

На сотрудников возлагаются определенные обязанности по охране труда и технике безопасности, определяемые Правилами внутреннего трудового распорядка, с которыми сотрудники знакомятся при поступлении на работу. Сотрудник должен ознакомиться с инструкциями по охране труда и технике безопасности, стандартными операционными процедурами (СОП), выполнять правила безопасности и информировать руководителя и службу охраны труда о возникновении аварийной ситуации и случаях производственного травматизма, а также о не соблюдении правил техники безопасности другими сотрудниками.

В обязанность Руководителя лаборатории входит обеспечение информированности персонала по всем вопросам безопасности, поддержание связи со службой охраны труда и техники безопасности, принятие мер к выполнению рекомендаций данной службы.

Основные принципы проведения экспериментов

Проведение экспериментов на лабораторных животных должно соответствовать общемировым принципам гуманного обращения с животными, тщательно планироваться, результаты эксперимента должны тщательно фиксироваться и храниться.

Выбор животных. Исследователь должен быть уверен, что выбранные животные наилучшим образом соответствуют целям эксперимента. Необходимо учитывать генетические характеристики, отсутствие болезней, факторы содержания и кормления, а также другие факторы, способные оказать влияние на результаты эксперимента. После выбора биологического вида, необходимо убедиться, что животных достаточно для проведения эксперимента. При проведении эксперимента животные не должны испытывать боли и страданий, поэтому после отбора соответствующих видов и экземпляров животных для эксперимента, необходимо обратить внимание на все аспекты, включая поведенческие характеристики животных.

Необходимый перечень СОПов при проведении доклинического исследования должен включать следующие позиции.

─ Животные: транспортировка, прием, идентификация, рандомизация, маркировка, обращение, взятие проб, наблюдение, эвтаназия, обращение с мертвыми животными.

─ Приборы: эксплуатация, техобслуживание, калибровка, очистка, допуск в эксплуатацию.

─ Реактивы: приготовление, маркировка, хранение, учет.

─ Записи: сбор данных, обработка данных, подготовка отчетов, архивирование.

─ Тест-система: подготовка помещений, условия окружающей среды, прием, передача материалов, размещение, установление характеристик, идентификация, уход, наблюдение, уничтожение.

─ Образцы: сбор, идентификация, обращение, вскрытие, гистопатология.

─ Лабораторные испытания: методы, валидация.

─ Управление и организация: система документооборота, обучение персонала, . аудит и инспекции, архивирование.

─ Компьютерные системы: проверка, эксплуатация, безопасность, резервирование, валидация.

Мониторинг. Ежедневно необходимо осуществлять наблюдение за здоровьем и поведением животных. Должны соблюдаться правила биобезопасности при работе с животными.

Записи. Исследователь должен ежедневно вести дневник экспериментальной работы, включающий детальное описание рутинных ежедневных процедур, условий окружающей среды и других факторов, не относящих к эксперименту, но которые могут влиять на результаты. Записи должны обеспечить возможность статистической обработки результатов эксперимента.

Консультации. При необходимости должны проводиться консультации с участием других научных сотрудников, ветеринаров, специалистов по лабораторным или диким животным. Участие ветврача необходимо в следующих случаях:

– использование транквилизаторов, аналгетиков и анестезии;

– премедикация, хирургия и после хирургическая помощь;

– использование паралитиков с анальгезией;

– длительное использование транквилизаторов, аналгетиков и анестезии.

Контрольный лист. После завершения планирования эксперимента исследователь должен перепроверить протокол для адекватного отражения следующих вопросов:

– Отвечает ли проект этическим и научным принципам?

– Могут ли быть достигнуты поставленные цели без использования животных?

– Есть ли какие-либо еще эксперименты, которые могут быть проведены параллельно для снижения количества используемых животных?

– Все ли средства и компетентный персонал имеются в наличии?

– Весь ли персонал оповещен о проведении эксперимента?

– Отобраны ли наиболее подходящие виды животных?

– Является ли подходящим биологический статус животных (генетический, микробиологический статус, способ кормления, общее состояние здоровья) для данного эксперимента?

– Подходят ли внешние условия (включая тип клеток, шум, освещение, температуру, влажность, вентиляцию, плотность содержания и социальную структуру)?

– Будут ли получены статистически достоверные результаты с минимальным количеством используемых животных?

– Если эксперимент связан с болью и дистрессом, то могут ли они быть минимизированы?

– Весь ли персонал обладает необходимой квалификацией для проведения манипуляций?

– Участвуют ли в эксперименте студенты и проинструктированы ли они?

– Какие мероприятия должны быть проведены для мониторирования состояния животных и их реакциям на манипуляции?

– Если подобные эксперименты уже проводились, то зачем проводить данный эксперимент?

– Если животные используются повторно, то, как минимизировать кумулятивный эффект?

– Могут ли быть использованы какие-либо другие методы без животных для получения аналогичных результатов?

Клиническая лаборатория. Исследования по клинической биохимии и гематологии проводятся согласно протоколу конкретного исследования, и не используются для диагностики заболеваний в программе мониторинга здоровья.

Некропсия и гистопатология. Патоморфологические исследования проводятся для диагностики патологических изменений органов и тканей животных, находившихся в конкретных исследованиях, где они запланированы в протоколе. При выявлении патоморфологических изменений органов контрольных животных исследователь сообщает результаты исследований ветеринарному врачу лаборатории.

Мониторинг здоровья животных проводится следующими методами:

– серологические исследования на антитела к вирусам – методами ELISA и IFA;

– микробиология взятых при вскрытии животных – методами ПЦР и рутинными культуральными исследованиями;

– паразитология – микроскопическое исследование на наличие экзо- и эндопаразитов, патоморфологические исследования.

Ограничение боли и страданий. Боль и дистресс у животных не могут быть оценены теми же методами, что у человека. Поэтому решение о самочувствии животных принимаются исследователем, исходя из предположения об их отсутствии. Необходимо предпринимать следующие меры:

– использование наиболее подходящих и гуманных методов;

– использование всех технических навыков и компетентного персонала;

– адекватное мониторирование появления боли и дистресса;

– составление четкого плана для устранения нежелательных последствий от манипуляций;

– использование незамедлительных мер для предотвращения боли и дистресса;

– использование анестезии, анальгезии и транквилизаторов, подходящих для выбранного вида животных и целей эксперимента;

– разработка плана эксперимента, снижающего боль и дистресс;

– проведение эксперимента в наиболее сжатые сроки;

– использование подходящих методов эвтаназии.

Использование общей или местной анестезии, анальгезии или транквилизаторов должно соответствовать виду животных, а также критериям, принятым в медицине, ветеринарии или практике лабораторного животноводства.

Эксперименты, результаты которых могут быть искажены, могут быть проведены без анестезии. Дистресса в ряде случаев можно избежать без медикаментозного вмешательства. Например, за счет хорошей адаптации животных к внешним условиям до момента начала эксперимента.

Мониторинг животных во время и после эксперимента должен быть постоянным и адекватным боли и дистрессу. Если боль или дистресс во время эксперимента становятся нестерпимыми, то необходимо немедленно оказать необходимую помощь. Если исследователь не может оказать помощь самостоятельно, то необходимо немедленно вызвать ветврача.

Если в процессе эксперимента произошла незапланированная гибель животного, об этом необходимо оповестить ветврача и отразить это событие в протоколе эксперимента.

Исследователь должен знать, каким образом животное, участвующее в эксперименте, сигнализирует о боли и дистрессе. Любые изменения в сне, кормлении, поении, почесывании, поведении должны быть описаны, оценены и учтены в будущем.

Мониторинг состояния животного. Необходимо постоянно наблюдать, не появилась ли острая боль или дистресс у животных. Это может выражаться следующим образом:

агрессивное и/или ненормальное поведение (некоторое виды становятся слишком тихими);

– ненормальная стойка или движение;

– изменение сердечно-сосудистой и/или респираторной функций;

– быстрое снижение веса;

– снижение температуры тела;

– рвота; ненормальная дефекация или мочеиспускание.

Точки окончания эксперимента должны быть определены исследователем заранее. Смерть не должна изначально планироваться как точка окончания эксперимента. В качестве точек окончания эксперимента обычно принимают:

– если потери веса от первоначального превышают 20%;

– если произошла потеря в весе более чем 10% за 24 часа;

– если рост опухоли более чем на 10% превышает вес животного;

– если развился абсцесс;

– если температуры тела резко упала;

– если животное само себя покалечило;

– если животное не способно самостоятельно есть или вести нормальный образ жизни.

Все животные, отвечающие таким требованиям, должны быть подвергнуты эвтаназии, для избавления от боли и страданий.

Повторное использование животных в эксперименте. Обычно животных используют только в одном эксперименте. Однако в некоторых случаях можно повторно использовать животных, чтобы снизить общее количество животных в проекте и оградить от боли и страданий других животных. В этих случаях животных используют в процедурах, не связанных с болью и страданиями, или процедурах с небольшим биологическим стрессом, например изучение корма со взятием крови или неинвазивных процедурах. От одного эксперимента до следующего должно пройти достаточное количество времени для восстановления животного.

Длительность эксперимента ограничена целью исследования и должна быть максимально краткой, если связана с болью и страданиями животных.

ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА ЖИВОТНЫХ ЗАЧЕМ? 1) Транслируемые в клинику результаты (иногда) ОГРАНИЧЕНИЯ? 1) Этические вопросы 2) Дорого 3

ПИЛОТНЫЙ ЭКСПЕРИМЕНТ ЗАЧЕМ? 1) Корректировка и стандартизация протоколов 2) Выявление ошибок в дизайне эксперимента 3) Формирование рабочей команды Пилотный эксперимент экономит время и, в итоге, минимизирует использование лабораторных животных! 7

ПОДГОТОВКА К ЭКСПЕРИМЕНТУ 1) Организация необходимых условий для транспортировки и операции на животном (асептика!) 2) Получение и маркировка животных с указанием ФИО, организации и контактов ответственного исследователя 3) Уведомление всех участников эксперимента 4) Согласование с руководством 5) Проверка наличия всех расходных материалов 6) Handling 8

ПРОВЕДЕНИЕ ОПЕРАЦИИ 1) Хирургические манипуляции должны выполняться хирургами или опытными студентами-хирургами 2) Динамическое наблюдение за ЧСС, ЧДД и температурой тела животного 3) Продолжение ведения протокола эксперимента 4) Допустимо начало предоперационной подготовки следующего животного за 30-60 минут до завершения операции 5) Незамедлительное прекращение операции при выявление болезненных ощущений животного 6) Фиксация фото и видеоматериалов 10

ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫЙ ПЕРИОД 1) При операциях, связанных с потерей крови или тканей рекомендуется ввести подкожно физиологический раствор 2) Динамическое наблюдение за общим состоянием животного (боль, беспокойство) 3) Антибактериальная терапия (например, байтрил, 1мл, 1 раз в сутки в течение 5 дней) 4) Фиксация фото и видеоматериалов 5) В зависимости от вида животного – специальная диета 11

ВЫВЕДЕНИЕ ИЗ ЭКСПЕРИМЕНТА ТРЕБОВАНИЯ К ПРОВЕДЕНИЮ ЭВТАНАЗИИ: 1) Минимизация боли и стресса 2) Скорое наступление смерти 3) Бессознательное состояние 4) Воспроизводимость техники 5) Сохранность забираемых тканей Химическая 1) Передозировка наркотическим препаратом или сульфатом магния 2) Ингаляционные средства (камера с СО2) Физическая 1) Цервикальная дислокация 2) Декапитация 12

АНТИБАКТЕРИАЛЬНАЯ ТЕРАПИЯ Необходимо учитывать особенности операционной комнаты, особенно риски инфицирования животных до операции, во время оперативного вмешательства и в послеоперационном периоде. 1) При риске инфицирования необходима антибактериальная терапия, но в виварии могут обитать устойчивые к антимикробным препаратам возбудители 2) Необходимо правильно подбирать и комбинировать антимикробные препараты (в связи с перекрестной или природной устойчивостью к антимикробным препаратам) 3) Во время операции высокий риск инфицирования места имплантации скаффолдов 4) Необходимо уменьшить инфицирование операционной раны за счет обильного промывания раны антисептиками (водный раствор хлоргексидина), уменьшить контаминацию раны шерстью. 5) В опасных ситуациях до оперативного вмешательства начать прием противомикробных препаратов (чтобы на момент операции ткани животного уже были насыщены). 6) В послеоперационном периоде прием антимикробных препаратов не гарантирует отсутствие инфекционновоспалительного процесса 7) Необходима правильная антибиотикотерапия (см. выше) + длительность приема не менее 5 дней. 13

МАРКИРОВКА Правильная маркировка материала позволяет повысить информативность морфологического исследования и предотвратит возникновение ошибок. Поэтому необходимо ЗАРАНЕЕ ДО ОПЕРАЦИИ спланировать маркировку образцов. 1) Маркировка тканевого образца должна обозначать индивидуальные особенности этого образца: исследуемая группа, номер образца, дата эксперимента, ФИО экспериментатора, и т.п. Их можно указать на флаконе с фиксирующей жидкостью 2) Иногда необходима маркировка частей удаленного тканевого образца из области операции для того, чтобы ЧЕТКО УЗНАТЬ ТОПОГРАФИЮ происходящих при эксперименте процессов. А именно, когда: A. Имплантируемый скаффолд имеет сложное строение B. Область имплантации имеет сложное строение 3) Общие принципы маркировки для определения топографии процессов в области операции: 1) Маркировка проводится СТРОГО до помещения образца в формалин 2) Способы маркировки: шовными нитями разных цветов или с разным количеством стежков, несмываемыми красителями разных цветов (тушь, зеленка, специализированные красители для органов) 3) Обязательно протоколировать тип маркировки и ее обозначение 4) Способ маркировки необходимо ЗАРАНЕЕ обсуждать с морфологом и строго его соблюдать 5) Маркировку должен осуществлять человек, непосредственно участвующий в операции и знающий топографическую анатомию области операции 14

ОТВЕТСТВЕННОСТЬ Работа с лабораторными животными требует от вас — Заботу Знания Силы Время Терпение Цена халатности зачастую одна – смерть подопытного Помните, что в России есть уголовное наказание за жестокое обращение с животными 19

ЛАБОРАТОРНЫЕ ЖИВОТНЫЕ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

Текст работы размещён без изображений и формул. Полная версия работы доступна во вкладке «Файлы работы» в формате PDF

Лабораторные животные – это животные, специально выращиваемые для проведения на них медицинских, ветеринарных и биологических исследований. Они служат для диагностики некоторых инфекционных заболеваний, моделирования экспериментальных острых и хронических инфекционных процессов, установления вирулентности и токсикогенности изучаемых штаммов микробов, определения активности приготовленных вакцин и исследования их на безвредность.

В настоящее время для экспериментальных исследований используют почти всех представителей животного мира: от простейших до высших человекообразных обезьян.

Лабораторные животные подразделяются на основные и дополнительные. К основным относятся: лягушки, крысы, мыши, хомяки, морские свинки, кролики. К дополнительным – птицы, полевки, лошади, обезьяны, собаки, кошки, бараны, ослы. Чаще всего для проведения лабораторных исследований используют крыс, мышей, кроликов, морских свинок, так как обладают чрезвычайно высоким обменом веществ, высокой интенсивностью роста и развития, малым размером тела, большой плодовитостью, непродолжительным сроком беременности, способностью выкармливать свое потомство в короткие сроки. Для исследований создаются специально выведенные в лабораторных условиях линии животных.

В работе с лабораторными животными к ним предъявляются определенные требования. Они должны быть здоровыми, отличаться малой величиной, доступностью при обращении с ними, дешевизной разведения и содержания.

В Башкирском Государственном Аграрном университете имеется виварий, в котором содержатся разные виды животных – это коровы, лошади, овцы, кролики, крысы. Имеются и птицы – это гуси, куры, утки.

Успешность любого эксперимента определяется соблюдением техники и методики эксперимента, а также выбором лабораторных животных. Лабораторные крысы являются наиболее распространенным видом экспериментальных животных для разработки моделей последствий острых и хронических интоксикаций, поэтому нами были использованы крысы в остром эксперименте, где изучалось влияние различных доз этанола на организм животных. Крысы содержались в специальных боксах, на обычном пищевом режиме, со свободным доступом к воде.

При работе с лабораторными животными соблюдались правила безопасности. Животных фиксировали в специальном фиксаторе, во избежание укусов. Рис. 1

В конце эксперимента проводилось вскрытие животных, при котором были обнаружены патологии.

Также мы исследовали действие пробиотиков на обменные процессы в организме кроликов, сравнивая гематологические показатели. В этом случае были выбраны кролики, так как у них более удобно можно провести взятие крови, без специальных фиксаторов. Рис. 2

Таким образом, лабораторные животные являются очень важными моделями для установления диагноза при различных заболеваниях. Для точного результата необходимо использовать физиологически полноценных лабораторных животных, соблюдая требования по их кормлению и содержанию.

Рис. 1 Лабораторная крыса в фиксаторе, с подсоединенными электродами.

Рис. 2 Взятие крови у кролика.

Антонов Б.И. Лабораторные исследования в ветеринарии. – М.: Агропроиздат, 1991. – 45-51 с.

Каркищенко Н.Н., Грачев С.В. Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских исследованиях – М.: Профиль-2С, 2010. – 15-22 с.

РУКОВОДСТВО ПО СОДЕРЖАНИЮ И УХОДУ ЗА ЛАБОРАТОРНЫМИ ЖИВОТНЫМИ

Правила оборудования помещений и организации процедур

Guidelines for accommodation and care of animals. Environment, housing and management

Дата введения 2016-07-01

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила, рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Некоммерческим Партнерством «Объединение специалистов по работе с лабораторными животными» (Rus-LASA)

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 339 «Безопасность сырья, материалов и веществ»

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 22 декабря 2014 г. N 73-П)

За принятие стандарта проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Минэкономики Республики Армения

Госстандарт Республики Беларусь

Госстандарт Республики Казахстан

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 9 ноября 2015 г. N 1732-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33215-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2016 г.

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. — Примечание изготовителя базы данных.

Международный документ разработан группой экспертов Совета Европы

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Cентябрь 2019 г.

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.

В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге «Межгосударственные стандарты»

Оцените статью
Маркировка-Про